【摘 要】
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目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)炎症小体与下肢静脉性溃疡创面炎症反应的相关性.方法 选取24例活动性下肢静脉性溃疡患者(活动性溃疡组),另以24例无渗出性下肢静脉性溃疡患者作为阳性对照(非活动性溃疡组)和24例外伤患者伤口为阴性对照(外伤伤口组).比较3组患者的临床资料;同时采集创面周围组织标本,采用免疫组化方法检测其NLRP3蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测创面组织中IL-1β和IL-18蛋白水平,RT-PCR法检测创面组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、
【机 构】
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复旦大学附属中山医院青浦分院血管外科 上海201700;复旦大学附属中山医院青浦分院血管外科 上海201700;复旦大学附属中山医院血管外科 上海200032
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目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRP3)炎症小体与下肢静脉性溃疡创面炎症反应的相关性.方法 选取24例活动性下肢静脉性溃疡患者(活动性溃疡组),另以24例无渗出性下肢静脉性溃疡患者作为阳性对照(非活动性溃疡组)和24例外伤患者伤口为阴性对照(外伤伤口组).比较3组患者的临床资料;同时采集创面周围组织标本,采用免疫组化方法检测其NLRP3蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测创面组织中IL-1β和IL-18蛋白水平,RT-PCR法检测创面组织中凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1 (caspase-1)、C-Jun氨基端激酶(JNK)、丝裂原活化蛋白激酶p38、核因子-κB (NF-κB)p65及NF-κB抑制蛋白α (NF-κB IkBα)的mRNA表达水平,Western blotting法检测创面组织中NLRP3蛋白表达水平.结果 非活动性溃疡组和外伤伤口组患者创面炎症反应较活动性溃疡组平缓.活动性溃疡组创面组织中IL-1β和IL-18蛋白表达水平均高于非活动性溃疡组和外伤伤口组[IL-1β:(146.621±11.597)ng/L比(80.967±14.213)ng/L比(84.962±19.484)ng/L,F=136.200,P＜0.001;IL-18:(119.814±12.788)ng/L 比(72.899±17.220)ng/L比(48.131±10.407)ng/L,F=167.910,P＜0.001].RT-PCR结果提示活动性溃疡组患者创面组织中ASC[(0.030±0.012)ng/L比(0.021±0.005)ng/L比(0.016±0.004)ng/L,F=18.106,P＜0.001]、caspase-1[(0.054±0.012) ng/L比(0.013±0.009) ng/L比(0.018-0.006) ng/L,F=130.372,P＜0.001]、NF-κB p65[(0.093±0.015) ng/L比(0.038±0.013)ng/L比(0.043±0.014)ng/L,F=110.950,P＜0.001]、NF-κB IkB-α[(0.085±0.015)ng/L比(0.078±0.015)ng/L比(0.041±0.016) ng/L,F=53.070,P＜0.001]及JNK[(0.075±0.018)ng/L比(0.042±0.013)ng/L比(0.039±0.014) ng/L,F=41.271,P＜0.001]的mRNA表达水平均高于非活动性溃疡组和外伤伤口组,而活动性溃疡组创面组织中p38 mRNA表达水平低于非活动性溃疡组[(0.050±0.008)ng/L比(0.064±0.014)ng/L,P＜0.05].Western blotting结果显示活动性溃疡组创面组织中NLRP3蛋白相对表达量高于外伤伤口组及非活动性溃疡组(0.767±0.272比0.605±0.212比0.556±0.183,F=4.804,P=0.012).结论 NLRP3炎症小体与下肢静脉性溃疡创面炎症反应密切相关,可能为下肢静脉性溃疡的治疗提供新的靶点.
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