【摘 要】
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目的:研究miR-181a/b在肺癌细胞顺铂耐药形成中的作用。方法:运用miRNA实时定量PCR方法检测miR-181a/b在肺癌顺铂耐药细胞A549/CDDP与母代A549细胞中的表达差异,运用Western
【机 构】
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镇江市第二人民医院血液肿瘤科,南京医科大学第一附属医院肿瘤科,镇江市第三人民医院肿瘤科,
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目的:研究miR-181a/b在肺癌细胞顺铂耐药形成中的作用。方法:运用miRNA实时定量PCR方法检测miR-181a/b在肺癌顺铂耐药细胞A549/CDDP与母代A549细胞中的表达差异,运用Western blot检测A549/CDDP细胞与母代细胞抗凋亡蛋白BCL2、MCL1和XIAP的表达差异,分别构建BCL2、MCL1和XIAP的3′UTR荧光素酶报告质粒验证miR-181a/b的靶基因,在耐药细胞中瞬时转染miR-181a/b模拟物以检测上调miR-181a/b对A549/CDDP细胞中BCL2、MCL1和XIAP蛋白表达及耐药性的影响,并运用流式细胞术检测转染后耐药细胞对CDDP(Cisplatin,顺铂)诱导凋亡的影响。结果:在A549/CDDP细胞中miR-181a/b均呈低表达,而抗凋亡蛋白BCL2、MCL1和XIAP则呈高表达,荧光素酶报告实验证实BCL2、MCL1和XIAP是直接受miR-181a/b调控的靶基因,在耐药细胞中上调miR-181a/b显著抑制BCL2、MCL1和XIAP蛋白表达水平,显著增加耐药细胞对顺铂的敏感性,并显著增加耐药细胞对顺铂诱导的凋亡。结论:miR-181a/b靶向抑制多种抗凋亡蛋白表达可显著增加A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性。
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