目的以表达绿色荧光蛋白（GFP）的单纯疱疹病毒（HSV^GFP）建立一种快速检测循环肿瘤细胞（CTCs）的方法，并与常规细胞学检测方法的检测结果进行比较。方法将HSV^GFP与7个不同的肿瘤细胞系共培养，用荧光显微镜观察表达荧光的细胞。将10、100、1000和10000个人肺癌PG细胞加入到2ml全血中，以淋巴细胞分离液清除红细胞，同时富集肿瘤细胞。以HSV^GFP感染收集到的细胞，用荧光显微镜确定荧光细胞数量，分析HSV^GFP检测方法的敏感性。以HSV^CFP法检测70例肿瘤患者临床样本中的CSCs，并与其中15例有细胞学报告者的检测结果进行比较。结果HSV^GFP感染的7个肿瘤细胞系均表达绿色荧光。应用HSV^GFP检测方法，可以在仅加入了10个肿瘤细胞的2ml全血中检测出阳性结果。对70例临床样本采用HSV^GFP法进行检测的结果显示，有40例样本呈阳性反应。在15例有细胞学检测结果的临床样本中，细胞学检测阳性仅有4例，而HSV^GFP方法检测阳性有11例；其中细胞学检测阳性的4例样本，HSV^GFP检测均为阳性。结论以HSV^GFP检测患者体内CTCs的方法简便，且具有较高的敏感性。