【摘 要】
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目的 探讨黄连素对恶性黑色素瘤Toll样受体4(TLR4)信号通路的调节作用,评估其对脂多糖(LPS)诱导的恶性黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、凋亡的影响,为防治恶性黑色素瘤提供新的药物(黄连素)治疗依据.方法 采用Western blotting法检测不同浓度黄连素对A375细胞TLR4、核因子κB (NF-κB)表达的干预作用.实验分组:A组为对照组;B组为LPS组;C组为TAK-242组;D组为LPS+ TAK-242组;E组为LPS+ TAK-242+80 μmol/L黄连素组;F组为LPS+ T
【机 构】
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中国科学院大学附属肿瘤医院(浙江省肿瘤医院)病理科,浙江杭州310022
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目的 探讨黄连素对恶性黑色素瘤Toll样受体4(TLR4)信号通路的调节作用,评估其对脂多糖(LPS)诱导的恶性黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、凋亡的影响,为防治恶性黑色素瘤提供新的药物(黄连素)治疗依据.方法 采用Western blotting法检测不同浓度黄连素对A375细胞TLR4、核因子κB (NF-κB)表达的干预作用.实验分组:A组为对照组;B组为LPS组;C组为TAK-242组;D组为LPS+ TAK-242组;E组为LPS+ TAK-242+80 μmol/L黄连素组;F组为LPS+ TAK-242+ 120 μmol/L黄连素组.采用CCK-8、Transwell、流式细胞术检测黄连素靶向TLR4对A375增殖、迁移、凋亡的作用;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测每组细胞上清中白介素-10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)表达的影响.结果 黄连素浓度升高,TLR4、NF-κB蛋白表达量下调越明显(均P ＜0.05).与A组比较,B组增殖、迁移能力增强,凋亡无差异;C组增殖、迁移能力减弱,凋亡增加;D组增殖、迁移能力相较B组减弱,相较C组增强;与D组比较,E、F组增殖、迁移能力减弱,凋亡增加.黄连素在高浓度时细胞的增殖、迁移能力减弱更明显(均P＜0.05).B组IL-10与TGF-β的表达水平增加(均P＜0.05);C组IL-10的表达水平降低,TGF-β3的表达无显著变化;D组IL-10相较B组降低,相较C组增加;F组IL-10和TGF-β的表达水平显著降低(均P＜0.05).结论 黄连素通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制LPS诱导的恶性黑色素瘤细胞增殖、迁移,促进其凋亡.黄连素或可作为治疗恶性黑色素瘤的药物.
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