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目的构建针对转酮醇酶样基因1（TKTL1）特异性小干扰RNA（siRNA）真核表达载体并检测其沉默效应。方法采用人U6SnRNA启动子，分别把被9bp序列间隔的19bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列，置于pEGFP—C1-U6质粒载体中，构建成TKTL1短发夹环RNA，产生重组质粒pEGFP—C1—U6／TKTL1，分别用PstI和SalI酶切鉴定及测序分析，并将重组质粒转染人结肠癌细胞株LoVo，通过RT-PCR检测TKTL1基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明，TKTL1基因的s