同一猴、兔眼角膜细胞成分原代培养的实验研究

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目的建立从同一角膜片上分离培养角膜上皮、基质和内皮细胞的方法,为研究角膜细胞间的相互作用机制奠定基础.方法采用消化法分离培养猴眼角膜内皮细胞、上皮细胞和兔眼角膜上皮细胞,组织块培养法培养基质成纤维细胞和兔角膜内皮细胞.细胞接种于12孔培养板,并于培养不同时间行Wright染色检查细胞生长情况.结果采用消化法和组织块培养法能成功地培养猴、兔角膜上皮、基质和内皮细胞.猴、兔角膜内皮细胞培养1wk后,均能形成内皮细胞单层,细胞类似天然的六角形态,且以猴内皮细胞明显;猴角膜上皮细胞培养3~4d生长旺盛,但难以形成细胞单层,兔上皮细胞生长旺盛,1wk后已达融合状态,细胞呈膜状伸出板层伪足;猴、兔基质成纤维细胞易培养,1wk后已融合成单层细胞,细胞排列整齐,类似纤维走行样外观.结论从同一角膜材料中能分别培养出角膜3种细胞成份,消化法和组织块培养法相结合既能节省材料,又简单易行.
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