兔视网膜Mueller细胞原代培养

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目的 建立成年兔视网膜Mueler细胞体外原代培养方法。方法运用组织块培养法。分离出成年兔视网膜神经感觉层,剪成1mm×1mm大小组织块,置于含有20%胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培养液/F12培养,采用倒置相差显微镜、透射电子显微镜观察及荧光免疫组织化学染色的方法进行培养细胞的鉴定。结果培养的细胞块3d后可见部分细胞突起长出,7d后整个组织块周围放射状长出较多细胞。倒置相差显微镜下,培养细胞呈一端细胞体丰富膨大,另一端有一长突起,细胞核椭圆形,常有2个或2个以上核仁;透射电子显微镜下,细胞胞体大,细胞浆丰富,内含丰富的8~10nm的微丝。荧光免疫组织化学法显示细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白和胞内视黄醛结合蛋白阳性,阳性率达95%以上。结论运用组织块培养法可培养出兔视网膜Mueiler细胞。

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