【摘 要】
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背景:防龋DNA疫苗价格低廉、安全有效,有望成为人类抵抗龋病的重要手段,因而学者在寻找一种能高效诱导抗体产生的免疫途径或保护疫苗效价的缓释系统及佐剂,成为近年研究的热点.目的:观察聚乳酸乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸水凝胶负载pVAX1-SpaP/P防龋基因疫苗的免疫效应.方法:以聚乳酸乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸水凝胶分别负载重组质粒pVAX1-SpaP/P与空载质粒pVAX1.随机将28只新西兰大白兔分为7组,其中4组分别为股四头肌注射、颌下腺区皮下注射、口服、鼻腔滴注负载重组质粒pVAX1-Spa
【机 构】
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遵义医科大学口腔医学院,贵州省遵义市 563000;遵义医科大学,贵州省遵义市 563000;贵州省普通高校口腔疾病研究特色重点实验室,贵州省遵义市 563000;遵义医科大学,贵州省遵义市 5630
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背景:防龋DNA疫苗价格低廉、安全有效,有望成为人类抵抗龋病的重要手段,因而学者在寻找一种能高效诱导抗体产生的免疫途径或保护疫苗效价的缓释系统及佐剂,成为近年研究的热点.目的:观察聚乳酸乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸水凝胶负载pVAX1-SpaP/P防龋基因疫苗的免疫效应.方法:以聚乳酸乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸水凝胶分别负载重组质粒pVAX1-SpaP/P与空载质粒pVAX1.随机将28只新西兰大白兔分为7组,其中4组分别为股四头肌注射、颌下腺区皮下注射、口服、鼻腔滴注负载重组质粒pVAX1-SpaP/P的水凝胶,另3组为对照组,阴性对照组1股四头肌注射负载空载质粒pVAX1的水凝胶,阴性对照组2口服负载空载质粒pVAX1的水凝胶,空白对照组股四头肌注射生理盐水,初次免疫后1周增强免疫1次,间隔2周后加强免疫第2次,共免疫3次.应用ELISA法检测免疫前后唾液与血清中IgA型抗SpaP抗体、血清中IgG型抗SpaP抗体水平;免疫结束后第3天,免疫组化SP法检测免疫部位pVAX1-SpaP/P蛋白的表达.结果 与结论:①经不同途径免疫负载重组质粒pVAX1-SpaP/P的水凝胶,免疫后2周兔血清中IgG型抗SpaP抗体与IgA型抗SpaP抗体水平开始升高,IgG型抗SpaP抗体水平在第10周达到峰值,IgA型抗SpaP抗体水平在第6周达到峰值,口服组6-12周的IgG型抗SpaP抗体水平高于其他6组(P<0.05),颌下腺组4-8周的IgA型抗SpaP抗体水平高于其他6组(P<0.05);②经不同途径免疫负载重组质粒pVAX1-SpaP/P的水凝胶,免疫后1周兔唾液中IgA型抗SpaP抗体水平开始升高,第8周达到峰值,颌下腺组1-6周的抗体水平高于其他6组(P<0.05),口服组8-12周的抗体水平高于其他6组(P<0.05);免疫后第2周兔唾液中IgG型抗SpaP抗体水平开始升高,第10周达到峰值,口服组第2,3,6周的抗体水平高于其他6组(P<0.05),股四头肌组第10周的抗体水平高于其他6组(P<0.05);③经不同途径免疫负载重组质粒pVAX1-SpaP/P的水凝胶后,免疫组化染色显示免疫部位可见pVAX1-SpaP/P蛋白阳性表达;④结果表明,聚乳酸乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸水凝胶负载pVAX1-SpaP/P防龋疫苗经4种途径免疫后,能诱导兔机体产生特异性抗体发生免疫效应且维持较长时间.
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