【摘 要】
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目的 探索和建立人皮肤成纤维细胞(HDF)滋养层培养人角质形成细胞的技术方法。方法 在HDF滋养层制备中,对丝裂霉素C的较适浓度、同一株不同代数的HDF滋养层、滋养层的细胞密度对正常人表皮角质形成细胞(NHEK)生长的影响及NHEK的最低接种密度进行了初步的探索。结果 ①终浓度为10μg/mL的丝裂霉素C是制备HDF滋养层的较适浓度。②同一株1～20代的HDF滋养层对不同来源的NHEK均有较好的促
【机 构】
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中国协和医科大学、中国医学科学院皮肤病研究所南京210042,中国协和医科大学、中国医学科学院皮肤病研究所南京210042,中国协和医科大学、中国医学科学院皮肤病研究所南京210042,中国协和医科大
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目的 探索和建立人皮肤成纤维细胞(HDF)滋养层培养人角质形成细胞的技术方法。
方法 在HDF滋养层制备中,对丝裂霉素C的较适浓度、同一株不同代数的HDF滋养层、滋养层的细胞密度对正常人表皮角质形成细胞(NHEK)生长的影响及NHEK的最低接种密度进行了初步的探索。
结果 ①终浓度为10μg/mL的丝裂霉素C是制备HDF滋养层的较适浓度。②同一株1～20代的HDF滋养层对不同来源的NHEK均有较好的促生长增殖作用,1～20代HDF的培养代数与9例NHEK生长达80%融合时间(平均为11.1d)之间相关无显著性(r=-0.27,P>0.05)。③用HDF滋养层培养NHEK可减少原代培养NHEK的接种量,用NHEK最小接种密度是0.1×104/cm2经16d的培养可达80%的融合。
结论 同一株不同代的HDF适用于不同来源的NHEK培养。HDF滋养层可促进NHEK的生长,这可能是它减少NHEK原代培养接种量的原因之一。
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