【摘 要】
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目的 鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位.方法 应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体呈现的随机12肽文库进行3轮生物淘洗,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方
【机 构】
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广州中山大学肿瘤医院,510060;
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目的 鉴定能被BAC5单抗识别的定位于鼻咽癌细胞表面的抗原表位.方法 应用BAC5单抗作为靶抗体对噬菌体呈现的随机12肽文库进行3轮生物淘洗,用抗体捕获和竞争试验的夹心ELISA方法选择和鉴定阳性噬菌体克隆,对阳性和阴性噬菌体的外源性DNA片段进行序列分析,推导和比较由这些噬菌体所呈现的多肽氨基酸序列.结果 通过3轮生物淘洗能被抗体捕获的噬菌体克隆为77%(35/45).用竞争试验从所捕获的克隆中测得8个阳性克隆.来自这8个克隆的噬菌体呈现三种外源多肽,即-H-Q-S-H-Y-P-Y-P-V-V-S-L-(4/8)-Q-N-Q-A-W-F-S-Q-P-P-V-R-M-(3/8)和-T-Q-A-Y-K-G-F-P-V-L-P-S-(1/8),与来自阴性克隆的多肽序列-N-H-Q-S-T-F-W-Q-K-W-T-A-(6/6)比较,前3个序列在靠近肽的N端都具有相同的脯氨酸(P)和缬氨酸(V)结构(-P-V-).结论 BAC5单抗能识别近N端含有脯氨酸和缬氨酸结构的多肽.这些多肽可能模拟存在于鼻咽癌细胞表面并与BAC5单抗相关的抗原表位的构象.
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