【摘 要】
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目的探讨miRNA-218靶向Hoxb3对宫颈癌细胞迁移和上皮间质化的影响。方法采用双荧光素酶报告基因法分析miRNA-218-5p对Hoxb3 mRNA的靶向特异性。然后构建miRNA-218慢病毒载体，包装慢病毒，感染宫颈癌高转移性细胞系Caski，建立miRNA-218-5p稳定细胞系(实验组)和对照细胞系(对照组)。采用Western blot分析对照组和实验组细胞Hoxb3、E-cadh
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院检验科 200021,上海东方肝胆外科医院检验科 200433,上海东方肝胆外科医院检验科 200433
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目的探讨miRNA-218靶向Hoxb3对宫颈癌细胞迁移和上皮间质化的影响。
方法采用双荧光素酶报告基因法分析miRNA-218-5p对Hoxb3 mRNA的靶向特异性。然后构建miRNA-218慢病毒载体，包装慢病毒，感染宫颈癌高转移性细胞系Caski，建立miRNA-218-5p稳定细胞系(实验组)和对照细胞系(对照组)。采用Western blot分析对照组和实验组细胞Hoxb3、E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表达；采用双荧光素酶报告基因实验分析miRNA-218对其靶基因的影响；采用Transwell分析对照组和实验组细胞的侵袭能力；体内成瘤实验分析对照组细胞和实验组细胞的肿瘤生长和转移情况。
结果双荧光酶报告基因显示，与对照组比较，miRNA-218能与Hoxb3 3’-UTR结合，并下调荧光素酶的活性，差异具有统计学意义(t＝2.918，P<0.05)。与对照组相比，实验组细胞系Hoxb3、E-cadherin表达水平显著下调，而Vimentin和Snail蛋白表达水平则显著增加，差异具有统计学意义(t值分别为3.011、1.981、2.819和3.109，P值均<0.05)。实验组细胞侵袭能力较对照组细胞明显下降，差异有统计学意义(t＝4.120，P<0.05)。实验组细胞在体内移植后肿瘤体积和淋巴结转移病灶较对照组明显下降，差异具有统计学意义(t值为2.819和3.991，P值均<0.05)。
结论miRNA-218靶向下调Hoxb3蛋白表达，移植宫颈癌细胞的侵袭和上皮间质化。
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