重组核酸疫苗诱导小鼠抗血吸虫感染的免疫学研究

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目的 为日本血吸虫病的防治寻求新的高效联合基因免疫策略.方法构建共表达日本血吸虫相对分子质量23 000表膜蛋白(Sj23)基因与鼠IL-12基因的核酸疫苗质粒pVIVO2-IL12-Sj23,转染HEK-293细胞,通过RT-PCR,Western blot及ELISA法检测Sj23和IL-12蛋白的表达.接种并攻击感染BALB/c小鼠,以减虫率和减卵率评价其免疫保护力,同时设攻击感染对照组、空白质粒pVIVO2组、pVIVO2-IL12组和pVIVO2-Sj23组.用ELISA法和Western Blot分析免疫小鼠血清中抗体.以脾细胞培养法检测经SEA刺激后,小鼠脾细胞分泌IFN-γ和IL-4的水平.并以FCM分析脾细胞亚群.结果经瞬时转染HEK-293细胞证明质粒pVIVO2-IL12-Sj23能在体外进行表达.免疫小鼠后获得了45.53%的减虫率和58.35%的减卵率,较单价DNA疫苗pVIVO2-Sj23免疫效果好(P<0.05).ELISA法和Western Blot检测抗体结果表明免疫小鼠产生了抗Sj23特异性IgG抗体.pVIVO2-IL12-Sj23免疫组IFN-γ的水平较对照组显著升高而IL-4水平较对照组低.攻击感染后各实验组小鼠脾细胞的CD4+, CD8+亚群比率无显著差别(P>0.05).结论 pVIVO2-IL12-Sj23 DNA疫苗具有诱导BALB/c小鼠产生较好的抗血吸虫感染免疫保护效果.细胞因子IL-12作为基因佐剂,具有诱导Th1型免疫反应从而增强DNA疫苗免疫保护性的作用。

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