【摘 要】
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为探究溶血磷脂酰甘油酰基转移酶（lysophosphatidylglycerol acyltransferase, LPGAT）在中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）卵巢发育过程中的表达调控特征,本研究首先克隆了中华绒螯蟹Es-lpgat1的开放阅读框序列（登录号MZ312613）,进一步采用实时荧光定量PCR （q-PCR）、原位杂交（in situ hybridization,
【机 构】
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上海海洋大学农业农村部鱼类营养和环境生态研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（31572630）； 现代农业产业技术体系项目（CARS-48）； 上海市人才发展资金项目（2018100）；
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为探究溶血磷脂酰甘油酰基转移酶（lysophosphatidylglycerol acyltransferase, LPGAT）在中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）卵巢发育过程中的表达调控特征,本研究首先克隆了中华绒螯蟹Es-lpgat1的开放阅读框序列（登录号MZ312613）,进一步采用实时荧光定量PCR （q-PCR）、原位杂交（in situ hybridization, ISH）和RNA干扰分析其在卵巢发育过程中的时空表达模式。结果表明:（1） Es-lpgat1的开放阅读框全长1125 bp,编码374个氨基酸,其蛋白分子量为44kD,属于LPLAT超级家族,氨基酸序列与三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus）的LPGATl相似性最高;（2） qPCR结果表明, Es-lpgat1在中华绒螯蟹卵巢发育期的多种组织中均有表达,其中卵巢中的表达量最高,鳃中表达量最低（P<0.05）;（3）卵巢发育过程中,Ⅱ期卵巢和肝胰腺中Es-lpgat1表达量最高（P<0.05）,在卵巢Ⅲ～Ⅴ期的发育过程中有显著上升趋势;（4）原位杂交结果显示,在卵巢发育Ⅱ期,Es-lpgat1mRNA定位于卵黄发生前卵母细胞（PRO）和内源性卵黄合成期卵母细胞（EN）的细胞质中,此阶段信号较强;在卵巢发育Ⅳ期,卵巢中Es-lpgat1mRNA信号较弱;在Ⅱ期和Ⅳ期肝胰腺中的Es-lpgat1mRNA均主要定位于成纤维细胞（F）和吸收细胞（R）中;（5）干扰Eslpgat1后, Es-gpat2和Esdgat2的表达水平显著上调;而Es-agpat4和Es-dgat1的表达水平下调。综上所述, Es-lpgat1主要在中华绒螯蟹卵巢和肝胰腺中表达,可能参与卵巢发育期间的磷脂代谢。
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