火菇素的溶液二级结构与变性动力学

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanxinpp
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为了弄清抗肿瘤活性物质火菇素蛋白的二级结构及其活性在保存时自然衰减的规律,为临床应用提供依据,测定了火菇素的圆二色性并用蛋白质二级结构解析程序分析了火菇素的溶液二级结构,研究了火菇素的变性动力学.火菇素的远紫外圆二色性的研究表明,其水溶液在208 nm处表现为大负峰,最大平均残基摩尔椭圆度[θ]208=-6 574 deg@cm2@dmol-1,在223 nm处为肩.经二级结构解析程序计算分析,火菇素的二级结构组成为:α螺旋15.2%,平行β折叠片和β转角6.1%,反平行β折叠片32.7%,无规卷曲和γ转角23.4%,其中二硫键和芳香氨基酸对火菇素圆二色性的贡献占22.6%.热变性几乎使所有的二级结构都遭到破坏,转化为无规卷曲.利用已建立的火菇素免疫单向琼脂扩散定量检测技术,对在4℃下保存的火菇素进行了长期跟踪检测,结果表明,在保存过程中火菇素的活性逐步降低,同时其二级结构也被破坏.根据实验结果,建立了火菇素变性的一级动力学方程模型:Ct=Coe-t/r,该模型方程能很好地拟合实验结果.根据模型方程计算的火菇素的寿命为370 d,半衰期为256 d.说明火菇素这种很有应用前景的抗肿瘤药物比较容易长期保存.
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