【摘 要】
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目的 探讨达格列净对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法 46只Wistar雄性大鼠以随机数字表法分为对照组（NC组,n=10）和造模组（n=36）。成功构建DN模型的30只造模组大鼠随机分为模型组（DN组）、达格列净组（Dapa组）、达格列净+雷帕霉素组（Dapa+Rapa组）,每组10只。各组大鼠均给药干预12周,1次/d。采用血
【基金项目】
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郴州市技术创新引导项目（lcyl2021070）；
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目的 探讨达格列净对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法 46只Wistar雄性大鼠以随机数字表法分为对照组（NC组,n=10）和造模组（n=36）。成功构建DN模型的30只造模组大鼠随机分为模型组（DN组）、达格列净组（Dapa组）、达格列净+雷帕霉素组（Dapa+Rapa组）,每组10只。各组大鼠均给药干预12周,1次/d。采用血糖仪检测大鼠空腹血糖（FBG）。全自动生化分析仪测定大鼠血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h尿蛋白（UP）。HE染色观察大鼠肾组织病理形态学。透射电子显微镜观察大鼠肾脏足细胞变化。Western blot法检测足细胞标志蛋白（nephrin、podocin）、自噬蛋白（Beclin-1、LC3Ⅱ、P62）及mTOR信号通路相关蛋白（mTOR、p-mTOR）表达。结果 与NC组比较,DN组大鼠肾小球体积增大,肾小管上皮细胞空泡变性,存在大量炎性细胞浸润;足细胞足突融合,排列紊乱,可见明显线粒体嵴断裂或空泡化。与DN组比较,Dapa组和Dapa+Rapa组大鼠肾脏病理损伤明显减轻;足细胞可见部分足突融合,排列较整齐,整体情况明显改善。与Dapa组比较,Dapa+Rapa组大鼠肾脏病理损伤和足细胞整体情况显著改善。与NC组比较,DN组大鼠血清FBG、SCr、BUN、24 h UP水平均升高（P＜0.05）;肾组织nephrin、podocin、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均下降,P62蛋白表达水平、p-mTOR/mTOR比值均升高（P＜0.05）。与DN组比较,Dapa组和Dapa+Rapa组大鼠血清FBG、SCr、BUN、24 h UP水平均降低（P＜0.05）,肾组织nephrin、podocin、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均升高（P＜0.05）,P62蛋白表达水平、p-mTOR/mTOR比值均降低（P＜0.05）。与Dapa组比较,Dapa+Rapa组大鼠血清FBG、SCr、BUN、24 h UP水平均降低（P＜0.05）,肾组织nephrin、podocin、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平均升高（P＜0.05）,P62蛋白表达水平、p-mTOR/mTOR比值均降低（P＜0.05）。结论 达格列净通过调节足细胞自噬减轻DN足细胞损伤,进而改善DN,其作用机制可能与调控mTOR自噬信号通路有关。
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