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高迁移率族蛋白B4(high mobility group box,HMGB4)是HMGB家族的新成员,研究表明其可能在睾丸发育和精子发生等方面发挥重要作用.为进一步研究HMGIM的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行his—HMGB4融合蛋白表达载体的构建.序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌B121(DE3),异丙基pD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生his—HMGB4融合蛋白,继而纯化获得相对分子质量约25000的融合蛋白.将此融合蛋白免疫新西兰兔,经Western印迹和ELISA检测,制备的抗