鸡新城疫Ⅰ系疫苗株Vero细胞培养苗的研究

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本文将鸡新城疫Ⅰ系毒在vero细胞上进行了传代培养。结果表明,鸡新城疫Ⅰ系毒可以适应vero细胞并能产生明显的细胞病变。虽然其传代培养物的血凝价较低(1:10—1:40),但是,其培养物的TCID50值较高,达10-9.7/0.05ml。此外MLD,MDT/MLD和EID50的测定结果也表明,Ⅰ系毒vero细胞传代毒与鸡胚毒具有相同的毒价。Vero细胞可以用于鸡新城疫Ⅰ系毒的传代培养。免疫试验结果表明Ⅰ系毒Vero细胞培养物与鸡胚毒一样,具有良好的免疫原性,当免疫2月龄鸡4个月后,HI抗体还在6 log 2以上,免疫成年鸡13个月后,HI抗体还高达5.5log 2,与商品工系苗相比无明显差异。试验还证明,Vero细胞对鸡没有致瘤性,安全可靠,可以用于鸡新城疫Ⅰ系疫苗的生产。世界各国对于鸡新城疫已进行了六十多年的研究,在疫苗和免疫等方面的研究已取得了显著的成就。由于长期采用普遍的预防接种和综合性防治措施,已大大减少了该病引起的损失。但是,目前该病仍是养鸡业发展的主要威胁。当前我国对鸡新城疫的防治主要依靠疫苗接种,特别是弱毒疫苗的应用。而弱毒疫苗主要是用鸡胚或鸡胚细胞生产的。目前国内尚无足够量的SPF种蛋可用于疫苗生产,而应用普通种蛋制苗就有可能使疫苗中污染某些垂直传播性疾病的病源,如鸡白血病病毒、鸡慢性呼吸道病霉形体、鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌等等,致使这些疫病随疫苗的应用而发生意外传播。国内已有从商品疫苗和种蛋中分离出鸡白痢沙门氏菌、病原性霉形体和白血病病毒的报道[1,23,4]。只有应用SPF种蛋、异源动物、异源原代细胞或传代细胞制苗或制备灭活苗,才能避免这种危险。而应用异源传代细胞制苗除具有上述优点外,还有可进行大规模生产、节省饲养动物费等优点。国内已有应用异源胚和细胞进行鸡新城疫疫苗制造的报道[4,5,6,7]。但尚未有应用传代细胞制苗的报道。作者选用Vero传代细胞进行了鸡新城疫Ⅰ系毒的培养研究,以观察Ⅰ系毒在Vero细胞上的生长适应情况和制备传代细胞苗的可能性,试图解决普通种蛋制苗存在的受母源抗体干扰和携带垂直传播病原的问题,取得了良好的结果,现报告如下。
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