【摘 要】
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聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)较容易受到某些抑制成分的影响,尤其是在对复杂环境样品进行的荧光定量PCR反应中,定量结果的准确性更易受到影响。为减轻这种
【机 构】
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中国海洋大学环境科学与工程学院,中国海洋大学海洋环境与生态教育部重点实验室,中国海洋大学化学化工学院,中国海洋大学教育部海洋化学理论与工程技术重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金重大国际(地区)合作项目(40920164004);国家自然科学基金项目(40976044);海洋公益性行业科研专项项目(201105014)资助
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聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)较容易受到某些抑制成分的影响,尤其是在对复杂环境样品进行的荧光定量PCR反应中,定量结果的准确性更易受到影响。为减轻这种抑制作用,以采自长江口邻近海域沉积物的DNA为研究对象,采用稀释模板法和添加BSA法对荧光定量PCR反应进行了优化。结果表明2种方法都有减轻抑制的作用,但若考虑方法的准确性和检测的便捷性,则以添加BSA的方法更为优越,最适添加浓度为0.1～0.5μg/μL。这一检测方法的改进,为研究沉积物中微生物在硝化过程中的重要作用提供了可靠的技术途径。
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