论文部分内容阅读
目的
观察CD105-生物素-亲和素系统促进滑膜间充质干细胞的黏附和CD105阳性细胞的筛选,探讨软骨形成的效果。
方法酶消化获取滑膜干细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达。分3组(A:未处理+干细胞;B:亲和素化+生物素化干细胞;C:亲和素化+ CD105-生物素化干细胞),通过细胞吸光度值和显微镜下随机视野计数分别测定不同时间点细胞黏附数量;免疫荧光检测CD105阳性细胞的筛选。成软骨诱导3周后,通过苏木素-伊红(HE)染色、阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光观察3组软骨形成。
结果滑膜干细胞贴壁生长,呈星形或梭形;CD29、CD44、CD90阳性表达,CD34、CD45阴性表达,CD105阳性率约为42%。C组和B组早期黏附细胞数量增加,与A组比较在1、2 h差异有统计学意义(P< 0.05),B组虽然多于C组,但差异无统计学意义(P> 0.05)。免疫荧光显示C组黏附的CD105阳性细胞在1、2 h均明显高于B组和A组。软骨诱导培养后,3组均合成了蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,但是C组软骨特异性细胞外基质最多。
结论CD105-生物素-亲和素系统既增加了滑膜干细胞的黏附,又筛选了CD105阳性细胞,更好的促进了软骨形成。