【摘 要】
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目的:探讨PDLIM7?Nedd4?1通路在慢性肾功能衰竭(CRF)营养不良发病中骨骼肌萎缩的作用机制及肾衰营养胶囊的干预机制.方法:制备CRF营养不良大鼠模型,将判断为CRF营养不良的大鼠20只随机分为两组,肾衰营养胶囊组(实验组),另设假手术对照组;用组织贴壁法体外培养MSC及C2C12;HE染色测肌管横径;免疫荧光检测分化标记物;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;用MTT法检测细胞活性;细胞计数试剂盒(CCK?8)检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布;Western印记法检测ODPDLI
【机 构】
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南方医科大学深圳医院重症医学科,518000;南方医科大学深圳医院中医科,518000
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目的:探讨PDLIM7?Nedd4?1通路在慢性肾功能衰竭(CRF)营养不良发病中骨骼肌萎缩的作用机制及肾衰营养胶囊的干预机制.方法:制备CRF营养不良大鼠模型,将判断为CRF营养不良的大鼠20只随机分为两组,肾衰营养胶囊组(实验组),另设假手术对照组;用组织贴壁法体外培养MSC及C2C12;HE染色测肌管横径;免疫荧光检测分化标记物;平板克隆实验检测细胞克隆形成率;用MTT法检测细胞活性;细胞计数试剂盒(CCK?8)检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布;Western印记法检测ODPDLIM7?NEDD4?1信号通路蛋白的表达.结果:利用LV5慢病毒包装系统进行对照组和高表达PDLIM7慢病毒颗粒的包装,GFP荧光蛋白表达良好.与对照组相比,实验组的PDLIM7蛋白表达量增高(0.439±0.024 vs 0.591±0.022,P<0.01),NEDD4?1表达量下调(0.249±0.032 vs 0.676±0.053,P<0.01);C2C12的增殖速度增快(0.97±0.13 vs 0.55±0.08,P<0.05);高表达PDLIM7基因后C2C12细胞S期细胞所占比例明显增多(26.94±3.48％vs 12.50±1.66％,P<0.01).结论:PDLIM7?NEDD4?1信号通路参与蛋白质代谢和骨骼肌萎缩修复过程,肾衰营养胶囊可能上调PDLIM7蛋白的表达,抑制NEDD4?1表达量,进而促进骨骼肌萎缩修复过程.
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