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通过Overlap-PCR方法克隆了秦川牛(Bostams)的增食欲素受体1(HCRTRI)基因编码区全长,获得1278bp编码区全长序列(GenBank登录号:DQ874350),将其克隆至pMD-18T载体上,经测序表明获得的eDNA序列与GenBank公布的序列同源性均为98%。阳性质粒经BamH I和HindⅢ双酶切后,将目的片段定向克隆到pET32a(+)表达载体上,转化B121(DE3)感受态大肠杆菌(Escherichia coli),经鉴定正确后,用IPTG诱导目的蛋白的表达。SDS-PA