Overlap-PCR克隆秦川牛HCRTR1基因及其在大肠杆菌中的表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wk1990
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过Overlap-PCR方法克隆了秦川牛(Bostams)的增食欲素受体1(HCRTRI)基因编码区全长,获得1278bp编码区全长序列(GenBank登录号:DQ874350),将其克隆至pMD-18T载体上,经测序表明获得的eDNA序列与GenBank公布的序列同源性均为98%。阳性质粒经BamH I和HindⅢ双酶切后,将目的片段定向克隆到pET32a(+)表达载体上,转化B121(DE3)感受态大肠杆菌(Escherichia coli),经鉴定正确后,用IPTG诱导目的蛋白的表达。SDS-PA
其他文献
为分离和鉴定新疆野苹果(Malus sieversii Roem.)根组织干旱胁迫条件下差异表达的基因,以苗龄为3个月的新源1号新疆野苹果水培苗为材料,应用20%PEG6000溶液处理模拟干旱胁迫,利
Sox2, one of genes which express in embryonic stem (ES) cells, plays an important role in self renewal of ES cells, and is used to make induced pluripotent stem
广东省东莞市农业局4月8日出台《进一步完善农村(社区)集体经济组织股权管理的指导意见》,新政明确提出,按照“依规循章、规范严谨,保障权益、自愿有偿”的原则,在村(社区)内探索般权
从GenBank数据库上公布的5025条核桃(Juglans regia)EST序列中,用SSRHunter软件搜索到485条EST序列中含有540个SSR,SSR出现频率为10.75%,SSR-ESTs检出率为9.7%。利用检出的SSR-
在分析鸭瘟病毒(Duck plague virus, DPV )gB蛋白抗原性的基础上,设计1对引物克隆gB蛋白N端抗原性较好的抗原域编码基因,克隆到表达载体pET32a中,构建了原核表达质粒pET-gB1。将pE
采用PCR方法直接从牛早期胚胎细胞中扩增牛干扰素-tau(bovine interferon-tau,bIFN-τ)基因,并克隆到pGEM-T载体中。然后将含信号肽和不含信号肽的bIFN-τ片段分别与原核表达载
以枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)KD-N2为发酵菌种,分别以羽毛、人发为碳、氮源,研究了5L发酵罐内角蛋白酶的发酵动力学。根据Logistic方程和Luedeking—Piret方程建立了菌体生
生物信息学工具可以用于根据蛋白质的三维结构以及相似的氨基酸序列对蛋白质进行分类,而通过对各类蛋白的特性进行分析可预测蛋白质的潜在致敏性。很多研究只是单纯针对植物或
CELⅠ(celery)酶是定向诱导基因组局部突变(target inginducedlocal lesions in genomes,TILLING)技术中的关键酶,能够特异地识别并切割单碱基错配和扭曲的DNA异源双链。从芹菜(Ap
β-1,3-1,4-内切葡聚糖酶普遍存在于植物内生芽胞杆菌中,为了探讨其功能,以内生解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)TB2菌株基因组为模板,克隆了β-1,3-1,4-内切葡聚糖