Raf-1基因重组腺病毒siRNA载体构建及其对大鼠心肌细胞肥大的影响

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目的构建特异性抑制大鼠Raf-1基因的重组腺病毒载体,并将其体外转导大鼠心肌细胞中进行功能鉴定。方法合成针对大鼠Raf-1的靶序列及阴性对照序列,经退火形成的DNA双链定向克隆到穿梭质粒p Ad Track CMV中获得p Ad Track-siRaf-1质粒,Pme I线性化后在BJ5183细菌中与p Ad Easy-1骨架质粒进行同源重组获得p Ad-siRaf-1质粒,后转染HEK293细胞,包装获得p Ad-siRaf-1腺病毒颗粒,继而感染原代培养的心肌细胞,通过Western blot方法检测
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