丹皮酚对人大肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制

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目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)对人大肠癌HT-29细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用及可能的作用机制.方法:应用MTT法、荧光显微镜及透射电镜技术、TUNEL法和流式细胞仪技术观察不同浓度的Pae对HT-29细胞增殖的抑制及凋亡的诱导作用;应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2,Bax及P53表达的变化.结果:HT-29细胞经Pae(浓度范围7.81-250 mg/L)作用后细胞生长明显受到抑制,呈明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系;荧光显微镜及透射电镜观察到Pae作用后HT-29细胞出现典型的细胞凋亡形态;Pae在15.63,62.5,250 mg/L 3种浓度下作用48 h均可诱导HT-29细胞凋亡.TUNEL法显示凋亡指数与Pae浓度呈正相依赖关系:流式细胞仪技术检测其凋亡率分别为7.6%,16.2%和34.5%,也有明显的剂量效应关系,同时Pae使细胞周期分布发生明显变化,表现为S期细胞比例上升,G0/G1期和G2/M期细胞比例下降;免疫细胞化学结果显示Pae作用后HT-29细胞Bcl-2及P53蛋白表达显著降低,Bax蛋白表达无显著改变.结论:Pae能抑制HT-29细胞增殖并诱导其凋亡,呈现明显的剂量依赖效应关系和时间依赖效应关系.其作用可能与影响癌细胞的细胞周期、下调Bcl-2/Bax的比例及P53蛋白的表达有关.
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