【摘 要】
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目的：验证灵芝多糖微乳诱导结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）M1极化能力，以及联合PD-1抑制剂协同抗肿瘤的可行性。方法：采用“一步成乳法”制备灵芝多糖微乳（GLP-M），并对其进行理化性质表征。借助RAW264.7细胞考察GLP-M诱导巨噬细胞极化的能力；通过Transwell小室法考察GLP-M处理巨噬细胞后对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响，以及GLP-M处理肿瘤细胞后对巨噬细胞极化的影响；考察G
【机 构】
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南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)消化科
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目的：验证灵芝多糖微乳诱导结直肠癌肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）M1极化能力，以及联合PD-1抑制剂协同抗肿瘤的可行性。方法：采用“一步成乳法”制备灵芝多糖微乳（GLP-M），并对其进行理化性质表征。借助RAW264.7细胞考察GLP-M诱导巨噬细胞极化的能力；通过Transwell小室法考察GLP-M处理巨噬细胞后对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响，以及GLP-M处理肿瘤细胞后对巨噬细胞极化的影响；考察GLP-M诱导巨噬细胞产生活性氧（ROS）行为。建立荷MC38鼠源肠癌细胞的皮下移植瘤模型，以生理盐水和灵芝多糖为阴性对照和剂型对照组，设置GLP-M、PD-1抑制剂以及GLP-M+PD-1联合给药组；PD-1抑制剂每三天尾静脉注射一次，给药两次，其余制剂每天灌胃1次，给药6次。考察治疗期间肿瘤生长曲线、体质量变化、生存时间、病理切片等。结果：GLP-M粒径为（58.3±2.1）nm，Zeta电位为（-23.5±1.8）mV，多分散系数（PDI）为0.221±0.003，包封率为（82.5±3.2）%，TEM图显示GLP-M形态圆整、分散均匀。GLP-M干预IL-4诱导的RAW264.7细胞后CD86的表达量升高（33.2±1.9）%，ROS水平升高（39.4±2.5）%，均具有统计学差异。在RAW264.7与MC38细胞共培养模型中，GLP-M可以显著提高肿瘤细胞的增殖抑制率和凋亡率，促进巨噬细胞的CD86表达。体内抗肿瘤实验显示：GLP-M、PD-1以及GLP-M+PD-1的肿瘤抑制率分别为（44.3±4.2）%、（51.3±2.7）%和（63.7±4.3）%。GLP-M+PD-1组45 d生存率最高（25%），且该组肿瘤切片结果显示坏死明显，细胞增殖被显著抑制。结论：GLP-M可能通过干预TAMs M1极化的机制提高与PD-1抑制剂等免疫治疗协同抗结直肠癌治疗效能。
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