【摘 要】
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将长野芽胞杆菌的普鲁兰酶基因经密码子优化后,组建了人工合成的二联启动子Pga2,并将它克隆到枯草芽胞杆菌穿梭质粒p MK4-BPB以及自杀质粒p GE-BPB中;经转化和筛选获得了中性
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,中国科学院上海高等研究院、生物炼制实验室,白银赛诺生物科技有限公司,上海科技大学生命科学学院
【基金项目】
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上海市长三角科技联合攻关领域项目（15295810600）.
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将长野芽胞杆菌的普鲁兰酶基因经密码子优化后,组建了人工合成的二联启动子Pga2,并将它克隆到枯草芽胞杆菌穿梭质粒p MK4-BPB以及自杀质粒p GE-BPB中;经转化和筛选获得了中性蛋白酶基因npr E被敲除的普鲁兰酶生产菌株CH-1;该重组菌在基础培养基中所产普鲁兰酶的酶活达到30.3 U/m L;经过对培养基组分及发酵条件（培养温度、起始p H,起始接种量等）进行优化,确定了发酵的最适碳源为45 g/L的蔗糖,氮源为60 g/L的麸皮＋豆粕时,设定初始培养基的p H为6.2,在培养温度为32℃时进行
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