观察微小RNA(miRNA，miR)-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。
方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组(Blank)：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组(NC)：细胞转染无关序列；miR-329组：细胞转染miR-329。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人骨肉瘤U-2OS细胞和人成骨细胞hFOB1.19中miR-329和E2F1 mRNA表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞在48、72、96 h的增殖水平。转染48 h后收集细胞，采用Western blot法检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞中E2F1和核心结合蛋白因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、维甲酸α受体(RARα)蛋白的表达。
结果miR-329和E2F1 mRNA在人骨肉瘤U-2OS细胞、人成骨细胞中的表达水平分别为0.736±0.013、1.215±0.026和1.329±0.015、0.894±0.017，人骨肉瘤细胞中miR-329 mRNA表达水平明显低于人成骨细胞(P＝0.008)，E2F1 mRNA表达水平明显高于人成骨细胞(P＝0.003)。细胞转染后，Blank组、NC组和miR-329组在48、72、96 h细胞增殖水平分别为2.635±0.214、2.584±0.107和1.319±0.135，2.912±0.152、2.826±0.165和1.136±0.214，3.109±0.143、3.095±0.129和1.153±0.172，miR-329组人骨肉瘤细胞的增殖水平明显低于空白组和阴性对照组，且随时间延长其抑制人骨肉瘤细胞增殖的作用逐渐增强，差异均有统计学意义(F组间＝4.351，P＝0.036；F时间＝2.366，P＝0.043)。miR-329组E2F1的蛋白表达量明显低于空白组和阴性对照组，Runx2、OPN、RARα蛋白表达量明显高于空白组和阴性对照组，差异有统计学意义(F组间＝9.037，P＝0.025；F组内＝7.779，P＝0.028)。
结论miR-329能够通过下调E2F1表达抑制人骨肉瘤U-2OS细胞的增殖，并促进其成骨分化。