【摘 要】
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[目的]建立甲状腺细胞系细胞凋亡诱导模型。[方法]用0～64 mg/mL放线菌素D（Actinomycin D,ACT D）分别处理三种甲状腺细胞（Nthy-ori 3-1、TPC-1、BCPAP） 24 h,CCK8测定ACT D对三种甲状腺细胞系的半数抑制浓度(IC50)。选择半数抑制浓度分别作用于这三种细胞24 h，采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，采用蛋
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81972498）； 中国临床肿瘤学会基金项目（Y-HR2019-0310）；
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[目的]建立甲状腺细胞系细胞凋亡诱导模型。[方法]用0～64 mg/mL放线菌素D（Actinomycin D,ACT D）分别处理三种甲状腺细胞（Nthy-ori 3-1、TPC-1、BCPAP） 24 h,CCK8测定ACT D对三种甲状腺细胞系的半数抑制浓度(IC50)。选择半数抑制浓度分别作用于这三种细胞24 h，采用流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，采用蛋白免疫印迹（Western Blot,WB）方法检测凋亡相关蛋白表达情况。[结果]不同浓度ACT D处理24 h后，Nthy-ori 3-1、TPC-1、BCPAP细胞活力均降低（P<0.05），其中ACT D对三种细胞的24 h处理IC50分别为为64、32、64 mg/mL。采用相对应的IC50药物浓度分别处理上述细胞后，流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法结果表明三种细胞系的凋亡率相较于对照组有明显差异（P<0.05）; BCPAP细胞系:对照组和实验组凋亡率分别为7.40%±0.20%和28.8%±1.50%; Nthy-ori 3-1:对照组和实验组凋亡率分别为1.99%±0.08%和5.47%±0.57%; TPC-1:对照组和实验组凋亡率分别为1.50%±0.10%和10.50%±0.40%。WB检测凋亡指标（BAX,cleaved-Caspase3,cleaved-Caspase8）结果显示，三种甲状腺细胞系BCL-2表达均降低，BAX、cleaved-Caspase3、cleaved-Caspase8表达均增高。[结论]ACT D可有效诱导3种甲状腺细胞系凋亡。
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