李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP基因的克隆、原核表达及其抗血清制备

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本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;转化大肠杆菌BL21(DE3),并经WIG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1(25ku)和PNRSV2(29ku)融合蛋白。经过Ni-NTA亲和柱与SDS-PAGE分离纯化,获得大量表达融合蛋白,并免疫家兔制备了融合表达蛋白的特异性抗体。间接ELISA测定其效价分别为8×10^3和3.2×10^4。
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