pE6／p53／GFP重组真核表达载体的构建及其对肺腺癌细胞周期的影响

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nullg08

【摘要】

：

目的构建放射诱导启动子序列所调控的wt-p53抑癌基因的真核表达载体pE6-p53／GFP，并研究其功能。方法全基因合成方法获得放射敏感性增强子E6；PCR法从pcDNA3．1（＋）／p53质粒中扩增p53 cDN

【作者】

：

毛丽伟王卫东李德志陈正堂

【机构】

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第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所

【出处】

：

第三军医大学学报

【发表日期】

：

2007年24期

【关键词】

：

放射敏感性增强子 RT—PCR WESTERN BLOT radiation-inducible promoter RT-PCR Western blot

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目的构建放射诱导启动子序列所调控的wt-p53抑癌基因的真核表达载体pE6-p53／GFP，并研究其功能。方法全基因合成方法获得放射敏感性增强子E6；PCR法从pcDNA3．1（＋）／p53质粒中扩增p53 cDNA全长序列；双酶切IRES2-EGFP双顺反子表达载体，获得IRES2-EGFP报告基因片段，以pCI-neo为载体构建重组pE6／p53／GFP。重组体经双酶切、测序鉴定其正确性。采用脂质体法将重组质粒转染H1299（p53^-/-）细胞，G418筛选出稳定表达细胞株。RT-PCR分析基因整合

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