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目的
探索小标本高效快速分离培养头皮毛乳头细胞的方法。
方法2018年9月至2019年1月于陆军军医大学第一附属医院皮肤科收集3例头部色素痣、6例皮脂腺痣患者切除术后废弃的含毛皮肤标本，大小为0.5 cm × 0.5 cm ~ 0.5 cm × 1 cm。剪下含有毛囊的皮下脂肪层，用眼科镊分选出其中的毛囊，0.6%分离酶Ⅱ消化30 min，然后采用0.2%胶原酶Ⅳ 37 ℃消化30 ~ 60 min，离心获得毛乳头。对分离的毛乳头进行形态学观察，同时培养、传代、鉴定毛乳头细胞。
结果小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头镜下呈倒梨形，形态完整，部分可见残留真皮鞘，而一步酶消化法未分离出毛乳头。小标本二步酶消化法毛乳头分离率为60.8% ± 2.1%，72 h毛乳头细胞贴壁率为86.6% ± 3.9%，细胞迁出时间0.5 ~ 3.0 d，实验总操作时间2.0 ~ 3.0 h，实际操作时间1.0 ~ 1.5 h。小标本二步酶消化法分离的头皮毛乳头细胞早期可呈凝集性生长，从第9代细胞开始呈非凝集性生长。
结论小标本二步酶消化法是一种简单、高效分离人头皮毛乳头细胞的方法。