乙型肝炎病毒对HepG2细胞表达TLR3的影响

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目的乙肝病毒全基因组体外扩增,构建质粒并测序,酶切后瞬时转染HepG2细胞,观察对HBV抗原分泌,病原识别受体Toll样受体3(TLR3)的表达及细胞增殖的影响。方法长片段PCR法扩增HBVDNA全长,构建pBlueScript—HBV质粒并转化宿主菌,摇菌后提取质粒经测序,用SapI酶切,获得HBV3.2kb基因组,采用脂质体瞬时转染HepG2细胞株,IMX检测HBV所分泌抗原,台盼蓝计数检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测表达TLR3的阳性细胞百分率,并与空白对照组对比。结果HBsA
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