一种枯草芽孢杆菌亮氨酸氨肽酶的提取及部分酶学性质研究

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采用(NH4)2SO4盐析法、有机溶剂沉淀法以及超滤浓缩等操作提取亮氨酸氨肽酶,初步建立了一种易于规模化提取枯草芽孢杆菌亮氨酸氨肽酶的工艺。发酵液采用质量分数为15%的(NH4)2SO4澄清,再经30kDa的超滤膜浓缩2.5倍时,纯化倍数为6.1,酶的回收率为87.7%。超滤后的保留液再经质量分数为25%的(NH4)2SO4盐析,可沉淀出保留液中90%的酶。按此工艺超滤浓缩后的液态酶稳定性较好,85d仍能保留80%以上的酶活。Co2+对此亮氨酸氨肽酶有较强的激活作用,Zn2+、Fe2+、Mn2+和Ca2+等几种金属离子对酶有不同程度的抑制作用。
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