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为了研究骨桥蛋白基因(OPN)在奶山羊(Caprahircus)乳腺组织不同泌乳期的变化规律及其功能,采用SYBRGreen染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,以β-actin基因为内参,对该基因在乳腺组织泌乳28d、60d、100d、190d、270d和330d的mRNA表达水平进行检测;同时将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA3.1-OPN,所获重组质粒经过酶切和测序鉴定后,转染MCF-7细胞,采用MTT(四唑盐,3-(4,5)-dimethylt