【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA SNHG14(lncRNA SNHG14)对碘乙酸钠(MIA)诱导的大鼠软骨细胞损伤的影响及分子机制.方法 4μmol/L MIA诱导软骨细胞损伤模型,将其分为对照组、MIA组、MIA+si-NC组、MIA+si-SNHG14组、MIA+miR-NC组、MIA+miR-149-5p组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-NC组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-149-5p组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA SNHG14和miR-14
【机 构】
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721000 陕西省宝鸡市,宝鸡职业技术学院康复教研室;西安中医脑病医院康复治疗科;西安市红会医院骨科
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目的 探讨长链非编码RNA SNHG14(lncRNA SNHG14)对碘乙酸钠(MIA)诱导的大鼠软骨细胞损伤的影响及分子机制.方法 4μmol/L MIA诱导软骨细胞损伤模型,将其分为对照组、MIA组、MIA+si-NC组、MIA+si-SNHG14组、MIA+miR-NC组、MIA+miR-149-5p组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-NC组、MIA+si-SNHG14+anti-miR-149-5p组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA SNHG14和miR-149-5p的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平;双荧光素酶报告实验检测lncRNA SNHG14和miR-149-5p的靶向关系.结果 与对照组相比,经MIA诱导的软骨细胞损伤中,lncRNA SNHG14表达水平升高,miR-149-5p表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高,Bcl-2表达水平与SOD和CAT活性降低,Bax和MDA表达水平升高(P<0.05).抑制lncRNA SNHG14和过表达miR-149-5p均降低细胞凋亡率,提高Bcl-2表达水平与SOD和CAT活性,降低Bax和MDA表达水平(P<0.05).lncRNA SNHG14靶向调控miR-149-5p表达,且下调miR-149-5p能逆转抑制lncRNA SNHG14表达对细胞凋亡及氧化应激反应的影响(P<0.05).结论 抑制lncRNA SNHG14通过靶向上调miR-149-5p减轻MIA诱导的软骨细胞损伤.
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