利用试剂盒快速检测苹果锈果类病毒的研究

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为简化苹果锈果类病毒(apple skin scar viroid,ASSVd)的常规RT-PCR检测步骤,找到更为快速准确的检测方法,以感染ASSVd的田间苹果枝条为试验材料,根据基因库中ASSVd的基因序列设计合成特异性引物,选用国产试剂盒,对RT-PCR体系进行优化.结果表明,总RNA和反转录产物的用量分别为37.4~74.8 ng、1.0~3.0 μL,退火温度为63.8℃,可以获得良好的两步RT-PCR扩增;而总RNA用量为3.74~7.48 ng、退火温度在50.1~62.6℃范围内时,一步R
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