【摘 要】
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目的:应用胚胎干细胞实验模型评价辛弗林的胚胎毒性.方法:分别将小鼠成纤维细胞NHI/3T3和小鼠胚胎干细胞ES-D3用含不同浓度辛弗林的培养基进行培养,CCK-8法检测辛弗林对3T3细胞和D3细胞的半数生长抑制浓度IC503T3和IC50D3.悬滴-悬浮-贴壁法培养D3细胞向心肌细胞分化,并通过实时定量PCR法检测不同辛弗林浓度培养条件下心肌分化特异基因肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,计算D3细胞半数分化抑制浓度ID50D3.再将IC503T3、IC50D3和ID50D3代入胚胎毒性评价公式计算,根据计
【机 构】
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重庆市九龙坡区中医院 重庆400050;重庆医药高等专科学校;武汉市中心医院;重庆市九龙坡区中医院 重庆400050;华中科技大学同济医学院附属同济医院
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目的:应用胚胎干细胞实验模型评价辛弗林的胚胎毒性.方法:分别将小鼠成纤维细胞NHI/3T3和小鼠胚胎干细胞ES-D3用含不同浓度辛弗林的培养基进行培养,CCK-8法检测辛弗林对3T3细胞和D3细胞的半数生长抑制浓度IC503T3和IC50D3.悬滴-悬浮-贴壁法培养D3细胞向心肌细胞分化,并通过实时定量PCR法检测不同辛弗林浓度培养条件下心肌分化特异基因肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,计算D3细胞半数分化抑制浓度ID50D3.再将IC503T3、IC50D3和ID50D3代入胚胎毒性评价公式计算,根据计算结果评价辛弗林的胚胎毒性.结果:辛弗林对3T3细胞和D3细胞的半数生长抑制浓度IC503T3和 IC50D3分别为(1 393.70±12.68)mg·L-1 和(1 127.01±22.18)mg·L-1,对 D3细胞半数分化抑制浓度 ID50D3为(822.60±9.59)mg·L-1.计算结果显示Ⅰ值＞Ⅱ值,且Ⅰ值＞Ⅲ值.结论:根据胚胎干细胞实验判定标准,预测辛弗林无胚胎毒性.
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