桑黄多糖抑制胶质瘤细胞增殖与迁移作用机制研究

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:skyfis
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目的 桑黄多糖(phellinus igniarius polysaccharide,PP)属于真菌类多糖,具有抑制肿瘤细胞生长和转移的作用,并能够促进肿瘤细胞凋亡.目前关于桑黄多糖对胶质瘤细胞增殖与凋亡的影响尚罕见相关报道.因此,本研究探讨桑黄多糖对胶质瘤细胞增殖、转移与凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 使用不同浓度PP处理胶质瘤细胞,应用MTT比色法测胶质瘤细胞的增殖抑制率,采用划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力,使用流式细胞计数测定胶质瘤细胞的凋亡及细胞周期,并使用蛋白印迹法及实时荧光定量PCR (quantitative realtime PCR,qRT-PCR)测定PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt、Cyclin A、CDK4、Cyt-C和Caspase3的变化.结果 MTT检测结果表明,与对照组比较,经PP处理24 h后各组细胞增殖抑制率差异有统计学意义,F-34.230,P<0.05;经PP处理48 h后各组细胞增殖抑制率差异有统计学意义,F-1 260.663,P<0.05.划痕及Transwell细胞侵袭实验显示,经PP处理48 h后的细胞比对照组细胞的迁移率明显降低,穿膜细胞数明显减少,F值分别为91.381和111.711,均P<0.05.经PP处理48 h后胶质瘤U251细胞凋亡结果显示,对照组、A组、B组、C组细胞凋亡率差异有统计学意义,F=175.669,P<0.05;G0/ G1期比例显著降低,F=175.440,P<0.05;而S期比例升高,F=72.839,P<0.05.蛋白质印迹及qRT-PCR结果显示,与对照组比较,A、B、C组U251细胞中Cyclin A、CDK4蛋白(F值分别为138.592、208.075,均P<0.05)及mRNA(F值分别为238.489、29.200,均P<0.05)明显下降,Cyt-C、Caspase3蛋白(F值分别为107.956、19.818,P<0.05)及mRNA(F值分别为76.297、46.933,均P<0.05)的表达明显增加;经PP处理48 h后胶质瘤U251细胞中PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白(F值分别为155.631、167.037、167.691和153.383,均P<0.05)及PI3K、Akt mRNA(F值分别为288.840、46.960,均P<0.05)的表达明显降低.结论 桑黄多糖可能是通过PI3K/Akt信号通路抑制胶质瘤细胞的增殖与转移.
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