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目的
观察白藜芦醇(Res)对瘢痕疙瘩成纤维细胞自噬的影响,探讨Res抗瘢痕疙瘩增生机制。
方法取手术切除瘢痕疙瘩组织成纤维细胞原代培养,将瘢痕疙瘩成纤维细胞分为空白对照组和用含不同浓度(20、40、80、160 μmol/L)Res实验组,给药24、48 h后噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ及Beclin1 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测不同浓度Res对瘢痕疙瘩成纤维细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及Beclin1合成的影响。
结果Res显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,且存在一定的时间和浓度依赖性,随着浓度升高和时间延长,其抑制率由4.9%增至43.7%;Res作用后瘢痕疙瘩成纤维细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及Beclin1 mRNA相对表达量增加,分别从(1.367±0.141)升至(4.562±0.371)倍,(1.232±0.189)升至(3.603±0.297)倍。自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及Beclin1的吸光度(A)值分别从0.211±0.017升至0.872±0.052,0.171±0.021升至0.544±0.028。
结论Res有效促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及Beclin1 mRNA及蛋白表达,提高瘢痕疙瘩成纤维细胞自噬水平,抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖。