观察7次跨膜超蛋白家族成员4(TM7SF4)基因表达水平对乳腺癌细胞生物学行为的影响。
方法构建TM7SF4慢病毒表达载体,转染MCF-7人乳腺癌细胞株,下调TM7SF4基因的表达,运用Cellomics、流式细胞术、碘化丙锭-荧光活化细胞分类计(PI-FACS)法及克隆形成实验,研究TM7SF4基因对MCF-7细胞的增殖、凋亡、细胞周期及克隆形成能力的影响。
结果(1)对MCF-7细胞增殖能力的影响:MCF-7细胞连续培养5 d后,实验组细胞数为:(239.1±37.7)、(508.4±52.8)、(282.2±84.0)、(308.0±167.1)、(131.6±82.6)个/孔;而空白细胞组细胞数为:(382.8±38.0)、(1 115.0±155.9)、(1 426.2±192.4)、(2 468.4±232.6)、(2 903.0±165.7)个/孔,空质粒组细胞数为:(380.8±39.0)、(1 090.0±145.9)、(1 426.0±180.3)、(2 379.0±228.6)、(2 855.0±156.6)个/孔,结果显示实验组细胞生长及细胞增殖倍数明显受到抑制,与空白对照组及空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)对细胞周期的影响:实验组MCF-7细胞处于G0/G1期、S期、G2/M期的细胞数为(61.87±0.27)、(20.31±0.11)、(17.83±0.35)个/孔;而空白对照组处于G0/G1期、S期、G2/M期的细胞数为(57.46±1.40)、(30.42±0.36)、(12.83±0.55)个/孔;空质粒组处于G0/G1期、S期、G2/M期的细胞数为(57.78±1.23)、(30.11±0.47)、(13.30±0.79)个/孔。实验组与空白对照组、实验组与空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)对细胞凋亡的影响:实验组散点图MCF-7细胞的凋亡率为(9.94±0.57)%,峰型图MCF-7细胞的凋亡率为(27.37±1.11)%;空白对照组散点图MCF-7细胞的凋亡率为(5.88±0.23)%,峰型图MCF-7细胞的凋亡率为(23.34±0.50)%;空质粒组散点图MCF-7细胞的凋亡率为(5.80±0.24)%,峰型图的凋亡率为(23.37±0.46)%,实验组与空白细胞对照组及实验组与空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05);(4)对细胞克隆形成的影响:实验组形成细胞克隆集落数目为(11±3)个,空白细胞对照组为(34±2)个,空质粒组为(29±1)个。实验组与空白细胞组及空质粒组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论TM7SF4基因具有促进MCF-7乳腺癌细胞增殖、克隆形成的能力,同时抑制细胞凋亡及细胞周期进展。TM7SF4基因通过影响乳腺癌细胞生物学行为发挥促癌发生发展的作用。