【摘 要】
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目的 探讨改良型富血小板纤维蛋白（advanced platelet-rich fibrin,A-PRF）与β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate,β-TCP）构成比例对兔股骨缺损模型骨形成的作用及机制，为临床治疗骨缺损提供新思路。方法24只新西兰大白兔构建骨缺损模型并分为模型组、1∶1复合物组（A-PRF∶β-TCP=1∶1）、2∶1复合物组（A-PRF∶β-TCP=2∶1）
【基金项目】
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四川省科学技术厅项目（23ZDYF2009）； 四川省卫生和计划生育委员会科研课题（17ZD027）； 资阳市科技计划项目（Zykjjsc20-yyjc-2020-09）～～；
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目的 探讨改良型富血小板纤维蛋白（advanced platelet-rich fibrin,A-PRF）与β-磷酸三钙（β-tricalcium phosphate,β-TCP）构成比例对兔股骨缺损模型骨形成的作用及机制，为临床治疗骨缺损提供新思路。方法24只新西兰大白兔构建骨缺损模型并分为模型组、1∶1复合物组（A-PRF∶β-TCP=1∶1）、2∶1复合物组（A-PRF∶β-TCP=2∶1）与4∶1复合物组（A-PRF∶β-TCP=4∶1），每组6只。复合物组在骨缺损处填充复合材料，模型组不充填材料，8周后安乐法处死动物采标本。采用micro-CT测定股骨缺损区新生骨的骨密度（bone mineral density,BMD）、骨体积分数（bone volume fraction,BV/TV）、骨小梁厚度（trabecular thickness,Tb.Th）、骨小梁分离度（trabecular separation/spacing,Tb.Sp）。HE染色观察新骨及新生血管形成情况；扫描电镜观察新生骨组织的形态变化；酶联免疫法检测新生股骨组织中磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phospho-p38 mitogen activated protein kinase,p-p38MAPK）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP）、磷酸化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（phospho-cysteine aspartic protease-3,p-Caspase3）含量；实时定量PCR检测新生骨组织中骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein-2,BMP-2）、核因子κ-B配体受体致活剂（receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL）、p38MAPK的mRNA表达量；免疫组织化学法观察新生骨组织中OPG、BMP-2、RANKL、p-p38MAPK、p-Caspase3蛋白表达情况；荧光Tunel染色观察新生股骨组织中细胞凋亡情况。结果 模型组股骨缺损区域骨形成缓慢，成骨质量差。与模型组相比，复合物组动物股骨缺损区域成骨情况良好，BMD、BV.TV、Tb.Th、Tb.N升高，Tb.Sp下降，新生股骨组织中见新生毛细血管形成；p-p38MAPK、CHOP、p-Caspase3蛋白表达降低，OPG、BMP-2的mRNA与蛋白表达升高，RANKL与p38MAPK的mRNA表达降低（P＜0.05）；各组新生骨组织中的凋亡检测表明2:1复合物组样本中细胞凋亡率最低（P＜0.05）;A-PRF∶β-TCP=2∶1的配比成骨效果最佳。结论 由APRF与β-TCP组成复合物能促进OPG表达，抑制RANKL表达和p38MAPK磷酸化，减少新生骨组织细胞凋亡，促进成骨分化。
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