【摘 要】
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目的 探讨食管癌组织中KAT2A与Survivin蛋白乙酰化相关性及下调KAT2A对食管癌细胞Survivin乙酰化、Wnt/β-catenin通路及功能的影响。方法 免疫共沉淀实验（Co-IP）检测蛋白乙酰化，免疫组化及Western blot法检测蛋白的表达。生物信息学预测乙酰基转移酶以Survivin为底物发生乙酰化的关系，免疫荧光验证蛋白在癌组织中的定位及表达；构建合成KAT2A小干扰RN
【基金项目】
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河北省医学科学研究重点课题计划项目（20210985）； 承德市科学技术研究与发展计划项目（201606A036）；
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目的 探讨食管癌组织中KAT2A与Survivin蛋白乙酰化相关性及下调KAT2A对食管癌细胞Survivin乙酰化、Wnt/β-catenin通路及功能的影响。方法 免疫共沉淀实验（Co-IP）检测蛋白乙酰化，免疫组化及Western blot法检测蛋白的表达。生物信息学预测乙酰基转移酶以Survivin为底物发生乙酰化的关系，免疫荧光验证蛋白在癌组织中的定位及表达；构建合成KAT2A小干扰RNA序列，脂质体介导法转染食管癌细胞，qRT-PCR检测mRNA的相对表达量，应用MTT、划痕愈合和Transwell小室实验检测细胞存活率、迁移和侵袭能力。结果 免疫组化结果显示，食管癌组织中Survivin蛋白阳性率为71.11%（32/45）,高于正常食管黏膜组织的28.89%（13/45）;癌组织和正常食管黏膜组织中KAT2A蛋白阳性率分别为75.56%（34/45）和24.44%（11/45）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Western blot结果显示，Survivin在癌组织中表达为（74.35±3.43）%,高于正常食管黏膜组织（22.62±2.48）%;KAT2A在癌组织中表达为（70.68±3.15）%,高于正常食管黏膜组织（23.87±2.67）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌组织中Survivin蛋白发生了乙酰化，其乙酰化率为（66.48±3.14）%,高于正常食管黏膜组织的（17.31±2.42）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。生物信息学预测显示：乙酰基转移酶KAT2A可以催化Survivin为底物发生乙酰化，且免疫荧光证实Survivin和KAT2A蛋白在癌组织中同时呈高表达，两者主要表达于细胞质中，部分表达于细胞核中；食管癌组织中Survivin乙酰化和KAT2A表达呈正相关（r=0.326,P=0.025）;体外实验结果显示，KAT2A在食管癌EC109细胞中的阳性率为（87.36±4.24）%,高于正常食管上皮HEEC细胞的（17.45±2.78）%。食管癌EC109细胞内Survivin蛋白乙酰化水平为（87.79±4.12）%,显著高于正常食管上皮HEEC细胞中的（21.28±3.78）%。下调KAT2A后食管癌细胞内Survivin乙酰化水平显著下降，同时wnt3α、β-catenin和c-myc蛋白表达量下降，且抑制了细胞存活、迁移和侵袭能力。结论 食管癌病变过程中乙酰基转移酶KAT2A高表达与Survivin蛋白乙酰化修饰具有相关性；KAT2A下调可使Survivin发生去乙酰化，并通过阻断Wnt/β-catenin信号通路影响食管癌细胞的功能。
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