藏灵菇源克鲁维酵母M3菌株胆盐水解酶的分离纯化研究

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为获得藏灵菇马克斯克鲁维酵母M3菌株胆盐水解酶(BSH)的纯品,探讨TBSH粗品的分离纯化方法。粗酶液采用硫酸铵分级沉淀,再以DEAE—Sepharose Fast Flow离子交换介质,分别考察缓冲液pH值、流速和洗脱方式等对BSH分离纯化的影响。结果表明,在40%-70%饱和度的硫酸铵条件下BSH提取效率最高。最佳层析条件为采用pH值为6.5、50mmol/L磷酸钠缓冲体系、1.5mL/min的流速,进行分步洗脱(100mmol/L、350mrnoUL、500mmol/L~600mmol/LNaCl及
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