非接触共培养条件下山羊BMSCs向纤维环样细胞诱导分化的研究

来源 :中国矫形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cm__
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[目的]建立山羊骨髓源性间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)和纤维环细胞(annulus fibrosus cells,AFCs)非接触共培养体系,探讨BMSCs向纤维环样细胞诱导分化潜能,为组织工程修复纤维环缺损研究提供种子细胞.[方法]复苏第3代AFCs和BMSCs,观察细胞形态并绘制生长曲线.采用Transwell系统共培养AFCs和BMSCs,7d后,检测BMSCs向纤维环样细胞分化情况.通过甲苯胺蓝染色检测聚集蛋白聚糖的表达,通过免疫细胞化学法检测Ⅰ型胶原蛋白的表达,realtime PCR检测Ⅰ型胶原、聚集蛋白聚糖和Sox-9 mRNA表达.[结果]非接触共培养7d后,BMSCs形态转变为纤维环细胞样.非接触共培养组中BMSCs的聚集蛋白聚糖与Ⅰ型胶原染色呈阳性,与AFCs对照组结果一致,BMSCs对照组结果呈阴性.与AFCs对照组相比,共培养组中Ⅰ型胶原、聚集蛋白聚糖及Sox-9的mRNA表达量分别为0.86、1.13和0.91 (P> 0.05),而BMSCs对照组中未检测到其表达.[结论]建立稳定的山羊AFCs和BMSCs非接触共培养体系,共培养7d后,BMSCs具有AFCs特性,表明共培养条件促进BMSCs诱导分化为纤维环样细胞.
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