【摘 要】
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目的 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建树突状细胞相关C型凝集素-1(Dectin-1)基因缺失小鼠模型,研究Dectin-1基因缺失对小鼠肿瘤生长的影响.方法 通过CRISPR-Cas9基因编辑技术设计靶向目的 基因的sgRNA实现Cas9蛋白对DNA双链的特异性切割.将体外转录纯化得到的sgRNA和ssDNA并与Cas9混合后,通过显微注射到C57BL/6小鼠的受精卵内并经胎盘移植到代孕小鼠体内,获得F0代小鼠.FO代小鼠通过基因鉴定和DNA测序获得Dectin-1基因缺失阳性子代小鼠.最后构
【机 构】
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江苏省常州市第二人民医院中心实验室,江苏常州213000
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目的 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建树突状细胞相关C型凝集素-1(Dectin-1)基因缺失小鼠模型,研究Dectin-1基因缺失对小鼠肿瘤生长的影响.方法 通过CRISPR-Cas9基因编辑技术设计靶向目的 基因的sgRNA实现Cas9蛋白对DNA双链的特异性切割.将体外转录纯化得到的sgRNA和ssDNA并与Cas9混合后,通过显微注射到C57BL/6小鼠的受精卵内并经胎盘移植到代孕小鼠体内,获得F0代小鼠.FO代小鼠通过基因鉴定和DNA测序获得Dectin-1基因缺失阳性子代小鼠.最后构建野生型与Dectin-1敲基因小鼠的肿瘤模型,经β-葡聚糖治疗后,观察两组小鼠的肿瘤生长情况.结果 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术成功敲除C57BL/6野生型小鼠的Dectin-1基因.PCR技术及DNA测序进一步显示Dectin-1基因部分碱基缺失,功能实验显示Dectin-1敲基因小鼠口服β-葡聚糖后肿瘤生长速度高于对照组小鼠,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建Dectin-1基因敲除小鼠模型,验证了Dectin-1对β-葡聚糖抗肿瘤的影响,为进一步研究Dectin-1基因在肿瘤免疫治疗中的作用奠定了基础.
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急性胰腺炎是胰腺的一种急性炎症,常见病因以胆源性及高脂血症性为主.近年来,随着人们生活方式及饮食条件的改变,以高脂血症性为病因的急性胰腺炎发病率呈上升趋势.高脂血症急性胰腺炎的治疗与预后往往与血清中的三酰甘油浓度有关.目前临床上的治疗方案有一般治疗、药物治疗、血液净化、中药辅助治疗等,而对某些特殊高脂血症急性胰腺炎,如家族性乳糜颗粒综合征,有着特殊的基因药物治疗方案.故本文就高脂血症急性胰腺炎治疗的研究进展作一综述,以期对临床医师治疗高脂血症急性胰腺炎患者起到帮助.
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随着人们生活水平的提高和饮食方式的改变,高脂血症急性胰腺炎(HLAP)的发病率持续上升,因其具有年轻化、重症化、易复发、症状不典型等发病特点,且目前尚无相关指南对其进行指导治疗,因此HLAP正在受到越来越多的关注.本文主要从病因、发病机制、治疗等方面对国内外HLAP的相关研究进行总结,认为高脂血症是HLAP的关键诱发因素,发病机制主要与游离脂肪酸损伤、微循环障碍、炎症反应、钙超载、氧化应激反应等相关,降脂为HLAP的治疗核心,目前主要通过降脂药物、胰岛素、低分子肝素、血液净化、中医药等进行降脂治疗,然而缺
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