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【摘要】目的:研究IL-17在正常卵巢组织，良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的表达，探讨IL-17在卵巢上皮性肿瘤血管形成中发挥的作用和意义。方法:用免疫组化法检测10例正常卵巢组织、10例良性卵巢上皮性肿瘤组织、9例交界性卵巢上皮性肿瘤组织、30例恶性卵巢上皮性肿瘤组织中IL-17的表达情况。结果:正常组织中未见IL-17表达，1例良性肿瘤组织表达，在交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达率分别为55.56%，63.33%。IL-17在交界性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率和恶性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率明显高于正常组织，及良性肿瘤组织，具有显著性差异（P < 0. 01）；正常卵巢组织和良性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比，无显著性差异（P>0.05）；交界性卵巢上皮性肿瘤组织和恶性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比较，无显著性差异（P>0.05）。IL-17阳性表达率与卵巢上皮性肿瘤的年龄、病理类型、组织学分级、淋巴结转移及临床分期未发现有相关性（P>0.05）。结论:IL-17在交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤组织中可见表达，实验证明IL-17对卵巢上皮性肿瘤的发生和进展过程中起重要作用。
【关键词】IL-17;卵巢上皮性肿瘤;免疫组化
【中图分类号】R445【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2010)012-0023-02
IL-17是目前新发现的CD4+记忆T淋巴细胞、CD8+细胞、嗜酸性粒细胞等多种细胞分泌的一种细胞因子，其强大的招募中性粒细胞的独特之处，及促进多种细胞因子释放，促进血管新生等作用，被认为参与了机体多种疾病的发生。目前，有关IL-17在卵巢肿瘤中表达的研究较少，且它在肿瘤发生发展中的所发挥的作用仍有待研究。本实验旨在通过研究IL-17在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达，探讨IL-17在卵巢上皮性肿瘤中发挥的作用和意义。
1 材料与方法
1.1 材料。
1.1.1 实验标本:选择哈尔滨科大学附属一院妇产科2006年1月至2009年6月手术切除上皮性卵巢肿瘤的病理科存档蜡块49例，10例正常标本来源于因其他疾病而切除卵巢的存档蜡块，连续切片，片厚4～5μm。上皮性卵巢肿瘤49例，包括良性上皮性卵巢肿瘤10例，交界性卵巢上皮性肿瘤9例，恶性卵巢上皮性肿瘤30例。恶性卵巢上皮性肿瘤中浆液性17例，粘液性13例。良性卵巢上皮性肿瘤包括浆液性7例，黏液性3例。所有患者术前均未化疗、放疗、激素及免疫治疗。
1.1.2 主要试剂:兔抗人Il-17多克隆抗体购于美国Santa cruz 公司，兔二步法检测试剂盒pv-600及DAB显色试剂盒购于武汉博士德生物有限公司。
1.2 实验方法:采用常规SP法，按说明书进行操作。以已知阳性片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液PBS代替一抗做阴性对照。
1.3 结果判定:以胞质和(或)胞膜染色呈棕黄色颗粒为IL-17阳性反应细胞，采用半定量积分法对每张切片的阳性细胞率和阳性细胞着色强度进行分级计分，然后根据2项之和确定其阳性强度。按阳性细胞率即阳性细胞占计数细胞总数的比例，以计数10个高倍视野细胞为准：阳性细胞≤5%为0分，6%～30%为1分，31%～50%为2分，> 50%为3分；按染色强度评分：无色为0分，弱染色为1分，中等染色为2分，强染色为3分。两者相加≤1分为（-），2～3分为（+），4～5分（++），> 5分为（+++）。
1.4 统计学处理:使用SPSS 13.0统计软件进行处理，数据间差异用χ2检验。P < 0.05 有统计学差异。
2 结果
2.1IL-17在正常卵巢组织、良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达在卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17主要表达在肿瘤细胞的细胞核、细胞浆中。正常组织中未见IL-17表达，1例良性肿瘤组织表达，在交界性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达为5例（55.56%），在恶性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达为19例（63.33%）。
经分析后可知，IL-17在交界性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率和恶性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率明显高于正常组织及良性肿瘤组织，具有显著性差异（P<0. 01）；正常卵巢组织和良性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比，无显著性差异（P>0.05）；交界性卵巢上皮性肿瘤组织和恶性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比较，无显著性差异（P>0.05），见表（1）。
2.2 IL-17表达与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理特征的关系恶性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达率与卵巢上皮性肿瘤的年龄、病理类型、组织学分级、淋巴结转移及临床分期无关，见表（2）。
3 讨论
IL-17作为细胞因子家族中的一员，可以诱导多种细胞因子的产生[1,2]。IL-17在免疫调节、炎症和肿瘤发生等方面发挥重要作用[3]，在抗感染、自身免疫性疾病及肿瘤免疫治疗等方面亦有重要作用。
IL-17和肿瘤的发生、发展之间的关系有两种不同观点。国外有学者认为，IL-17可以诱导MMP-9的表达，并可增强JEG-3的侵袭能力[3]。许多研究证实，MMP-9可以促进生长因子分，降解细胞外基质[1,2]，诱导肿瘤细胞凋亡耐受，促进肿瘤血管生成[1,3]，从而加速肿瘤生长、侵袭、转移。IL-17可以诱导MMP-9产生，可能是其促肿瘤发展的机制之一。
IL-17是一种促炎性细胞因子。研究证实[3]，在小鼠肿瘤模型中，IL-17可以促进血管形成，促进肿瘤的生长。Takeshi Kato等人的研究发现在卵巢癌中IL-17有一定程度的表达，并且其表达同肿瘤的血管生成有关[1]。
本文检测了IL-17在上皮性卵巢肿瘤的水平，发现IL-17在交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中有一定程度的表达，说明了IL-17在卵巢上皮性肿瘤的发生和发展中发挥了一定的作用。
对于肿瘤细胞的转移和消除，炎症性反应都是不可或缺的。IL-17，由Th17细胞产生的一种促炎性细胞因子，可能在肿瘤的发展中起双重作用。一方面，IL-17促进抗肿瘤细胞毒性T细胞反应，使得肿瘤消退；另一方面，通过促进血管生成和原发细胞转移，IL-17促进细胞生长。
IL-17在自身免疫中发挥重要的作用，在多发性硬化、风湿性关节炎、I型糖尿病中促进自身免疫和炎性反应。然而IL-17在肿瘤疾病中所发挥的作用仍不清楚，关于肿瘤中IL-17表达的研究有限。
参考文献
[1] Hwang SY, Kim JY, Kim KW, Park MK, Moon Y, Kim WU, Kim HY. IL-17induces production of IL-6 and IL-8 in rheumatoid arthritis synovialfibroblasts via NF-kappaB- and PI3-kinase/Akt-dependent pathways. Arthritis Res Ther, 2004;6:R120~8
[2] Fossiez F, Djossou O, Chomarat P, Flores-Romo L, Ait-Yahia S, Maat C, Pin JJ, Garrone P, Garcia E, Saeland S, Blanchard D, Gaillard C, Das Mahapatra B, Rouvier E, Golstein P, Banchereau J, Lebecque S. T cell interleukin-17 induces stromal cells to produce proinflammatory and hematopoietic cytokines. J Exp Med, 1996;183:2593~603
[3] Takahashi H, Numasaki M, Lotze MT. Interleukin -17 enhances bFGF- , HGF- and VEGF- induced growth of vascular endothelial cells [J]. Immunol Lett, 2005, 98(2): 189~193
作者单位：150000 黑龙江省中西医结合研究所
【关键词】IL-17;卵巢上皮性肿瘤;免疫组化
【中图分类号】R445【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2010)012-0023-02
IL-17是目前新发现的CD4+记忆T淋巴细胞、CD8+细胞、嗜酸性粒细胞等多种细胞分泌的一种细胞因子，其强大的招募中性粒细胞的独特之处，及促进多种细胞因子释放，促进血管新生等作用，被认为参与了机体多种疾病的发生。目前，有关IL-17在卵巢肿瘤中表达的研究较少，且它在肿瘤发生发展中的所发挥的作用仍有待研究。本实验旨在通过研究IL-17在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达，探讨IL-17在卵巢上皮性肿瘤中发挥的作用和意义。
1 材料与方法
1.1 材料。
1.1.1 实验标本:选择哈尔滨科大学附属一院妇产科2006年1月至2009年6月手术切除上皮性卵巢肿瘤的病理科存档蜡块49例，10例正常标本来源于因其他疾病而切除卵巢的存档蜡块，连续切片，片厚4～5μm。上皮性卵巢肿瘤49例，包括良性上皮性卵巢肿瘤10例，交界性卵巢上皮性肿瘤9例，恶性卵巢上皮性肿瘤30例。恶性卵巢上皮性肿瘤中浆液性17例，粘液性13例。良性卵巢上皮性肿瘤包括浆液性7例，黏液性3例。所有患者术前均未化疗、放疗、激素及免疫治疗。
1.1.2 主要试剂:兔抗人Il-17多克隆抗体购于美国Santa cruz 公司，兔二步法检测试剂盒pv-600及DAB显色试剂盒购于武汉博士德生物有限公司。
1.2 实验方法:采用常规SP法，按说明书进行操作。以已知阳性片作为阳性对照，磷酸盐缓冲液PBS代替一抗做阴性对照。
1.3 结果判定:以胞质和(或)胞膜染色呈棕黄色颗粒为IL-17阳性反应细胞，采用半定量积分法对每张切片的阳性细胞率和阳性细胞着色强度进行分级计分，然后根据2项之和确定其阳性强度。按阳性细胞率即阳性细胞占计数细胞总数的比例，以计数10个高倍视野细胞为准：阳性细胞≤5%为0分，6%～30%为1分，31%～50%为2分，> 50%为3分；按染色强度评分：无色为0分，弱染色为1分，中等染色为2分，强染色为3分。两者相加≤1分为（-），2～3分为（+），4～5分（++），> 5分为（+++）。
1.4 统计学处理:使用SPSS 13.0统计软件进行处理，数据间差异用χ2检验。P < 0.05 有统计学差异。
2 结果
2.1IL-17在正常卵巢组织、良性、交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达在卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17主要表达在肿瘤细胞的细胞核、细胞浆中。正常组织中未见IL-17表达，1例良性肿瘤组织表达，在交界性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达为5例（55.56%），在恶性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达为19例（63.33%）。
经分析后可知，IL-17在交界性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率和恶性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率明显高于正常组织及良性肿瘤组织，具有显著性差异（P<0. 01）；正常卵巢组织和良性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比，无显著性差异（P>0.05）；交界性卵巢上皮性肿瘤组织和恶性卵巢上皮性肿瘤组织的表达相比较，无显著性差异（P>0.05），见表（1）。
2.2 IL-17表达与恶性卵巢上皮性肿瘤临床病理特征的关系恶性卵巢上皮性肿瘤组织中，IL-17阳性表达率与卵巢上皮性肿瘤的年龄、病理类型、组织学分级、淋巴结转移及临床分期无关，见表（2）。
3 讨论
IL-17作为细胞因子家族中的一员，可以诱导多种细胞因子的产生[1,2]。IL-17在免疫调节、炎症和肿瘤发生等方面发挥重要作用[3]，在抗感染、自身免疫性疾病及肿瘤免疫治疗等方面亦有重要作用。
IL-17和肿瘤的发生、发展之间的关系有两种不同观点。国外有学者认为，IL-17可以诱导MMP-9的表达，并可增强JEG-3的侵袭能力[3]。许多研究证实，MMP-9可以促进生长因子分，降解细胞外基质[1,2]，诱导肿瘤细胞凋亡耐受，促进肿瘤血管生成[1,3]，从而加速肿瘤生长、侵袭、转移。IL-17可以诱导MMP-9产生，可能是其促肿瘤发展的机制之一。
IL-17是一种促炎性细胞因子。研究证实[3]，在小鼠肿瘤模型中，IL-17可以促进血管形成，促进肿瘤的生长。Takeshi Kato等人的研究发现在卵巢癌中IL-17有一定程度的表达，并且其表达同肿瘤的血管生成有关[1]。
本文检测了IL-17在上皮性卵巢肿瘤的水平，发现IL-17在交界性、恶性卵巢上皮性肿瘤中有一定程度的表达，说明了IL-17在卵巢上皮性肿瘤的发生和发展中发挥了一定的作用。
对于肿瘤细胞的转移和消除，炎症性反应都是不可或缺的。IL-17，由Th17细胞产生的一种促炎性细胞因子，可能在肿瘤的发展中起双重作用。一方面，IL-17促进抗肿瘤细胞毒性T细胞反应，使得肿瘤消退；另一方面，通过促进血管生成和原发细胞转移，IL-17促进细胞生长。
IL-17在自身免疫中发挥重要的作用，在多发性硬化、风湿性关节炎、I型糖尿病中促进自身免疫和炎性反应。然而IL-17在肿瘤疾病中所发挥的作用仍不清楚，关于肿瘤中IL-17表达的研究有限。
参考文献
[1] Hwang SY, Kim JY, Kim KW, Park MK, Moon Y, Kim WU, Kim HY. IL-17induces production of IL-6 and IL-8 in rheumatoid arthritis synovialfibroblasts via NF-kappaB- and PI3-kinase/Akt-dependent pathways. Arthritis Res Ther, 2004;6:R120~8
[2] Fossiez F, Djossou O, Chomarat P, Flores-Romo L, Ait-Yahia S, Maat C, Pin JJ, Garrone P, Garcia E, Saeland S, Blanchard D, Gaillard C, Das Mahapatra B, Rouvier E, Golstein P, Banchereau J, Lebecque S. T cell interleukin-17 induces stromal cells to produce proinflammatory and hematopoietic cytokines. J Exp Med, 1996;183:2593~603
[3] Takahashi H, Numasaki M, Lotze MT. Interleukin -17 enhances bFGF- , HGF- and VEGF- induced growth of vascular endothelial cells [J]. Immunol Lett, 2005, 98(2): 189~193
作者单位：150000 黑龙江省中西医结合研究所