观察COL10A1在头颈鳞癌(HNSCC)组织中的表达，探讨通过短发卡RNA(shRNA)抑制COL10A1表达对HNSCC细胞的作用。
方法通过Oncomine数据库和我院收集的7例配对的肿瘤及其正常组织，验证COL10A1蛋白的表达。进一步在细胞株Fadu、Cal-27中检测COL10A1蛋白的表达。以shRNA沉默COL10A1基因后，利用噻唑蓝比色和平板克隆实验检测HNSCC细胞增殖和克隆形成能力，Transwell迁移和侵袭实验验证细胞迁移和侵袭能力。蛋白质印迹实验探讨COL10A1抑制与肿瘤上皮-间充质转化(EMT)之间的联系。
结果Oncomine数据库荟萃分析提示COL10A1在HNSCC中高表达(中位秩92.0，P＝0.000)；我院组织标本验证COL10A1在HNSCC中表达增高(P＝0.001)；同时验证其蛋白的表达水平在HNSCC细胞株(Fadu、Cal-27)中，也较正常上皮细胞中增高。进一步成功合成针对COL10A1的shRNA片段，其抑制效率高达80%；沉默COL10A1后，噻唑蓝(MTT)实验显示Fadu-shRNA组和对照组比较，shRNA组受到抑制(F＝234.301 P＝0.002)，抑制作用随着时间的增加而增加(t＝12.814，P＝0.017)；Cal-27-shRNA组和对照组比较，shRNA组也受到抑制(F＝184.001，P＝0.028)，抑制作用随着时间的增加而增加(t＝10.214，P＝0.026)，两组间比较差异无统计学意义(P＝0.067)。平板克隆实验显示Fadu-shRNA、Cal-27-shRNA组单克隆数分别为34.6±6.1、30.3±8.3，和对照组(Vetor组)76.2±6.9、70.0±1.3，空白组73.3±2.1、71.9±1.1比较，差异有统计学意义(P＝0.000)。体外Transwell迁移实验显示Fadu-shRNA、Cal-27-shRNA组贴壁24 h后，穿过小室的细胞数分别为65.3±3.5、57.2±5.3，和对照组(Vetor组)89.1±1.9、77.2±2.3，空白组83.4±2.1、76.5±1.1比较，差异有统计学意义(P＝0.000)；体外Transwell侵袭实验显示Fadu-shRNA、Cal-27-shRNA组贴壁24 h后，基质膜上的细胞数分别为135.3±6.2、127.6±4.3，和对照组(Vetor组)229.1±5.7、200.3±1.2，空白组216.5±7.8、193.4±2.2比较，差异有统计学意义(P＝0.000)。随后验证沉默COL10A1后，EMT表达的变化。Western blot实验显示E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达增多，N-cadherin，Snail1、snail2表达降低。
结论COL10A1在HNSCC组织及细胞株中高表达，沉默COL10A1能抑制HNSCC细胞的集落形成和增殖、降低了细胞的侵袭和迁移能力，伴随着肿瘤EMT的抑制。通过沉默COL10A1导致的头颈肿瘤进展能力的下降，可能和肿瘤的EMT现象相关。