【摘 要】
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目的:通过构建重组大鼠TSHα链原核表达系统及表达产物的纯化工作,获得重组GST-rrTSHα融合蛋白,以备作为免疫原制备抗大鼠TSHα链的抗体。方法:提取大鼠垂体组织总RNA,RT-PC
【基金项目】
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天津市重中之重项目(05YFGDSF02700)
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目的:通过构建重组大鼠TSHα链原核表达系统及表达产物的纯化工作,获得重组GST-rrTSHα融合蛋白,以备作为免疫原制备抗大鼠TSHα链的抗体。方法:提取大鼠垂体组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠TSHα链编码序列,构建pGEX-3X/TSHα融合表达质粒转化入大肠杆菌中进行诱导表达。亲和层析纯化重组蛋白并以SDS-PAGE及Western Blot进行鉴定。结果:DNA序列分析表明重组pGEX-3X/TSHα质粒含有读码框正确的TSHα链编码序列,纯化产物的SDS-PAGE及Western Blot结果表明所获得的目的蛋白与预期分子量相符且可与抗GST抗体发生免疫识别。结论:成功获得重组GST-rrTSHα融合蛋白,为下一步的抗体制备奠定了基础。
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