基于NLRP3炎症小体的抑瘤汤联合紫杉醇对上皮性卵巢癌的作用研究

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目的 研究抑瘤汤对上皮性卵巢癌中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的作用。方法 通过免疫组化法比较人体的良性肿物和卵巢癌组织中NLRP3和白细胞介素(IL)-1β的表达水平;体外培养人上皮性卵巢癌细胞系A2780,分成对照组、化疗(给予DMSO溶解的紫杉醇100 nmol·L-1)组、化疗+抑瘤汤(1、10、100 mg·L-1)组,对照组加入等量DMSO,干预12、24、48、72 h后,CCK-8法检测细胞存活率,选取合适的抑瘤汤浓度及干预时间进行后续实验;Western blotting法检测NLRP3的蛋白表达;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和IL-1β的mRNA水平;ELISA法检测细胞上清液中NLRP3、Caspase-1、ASC和IL-1β蛋白水平。结果 与卵巢良性肿物组相比,卵巢癌患者的卵巢组织中NLRP3及IL-1 β蛋白表达显著上调(P<0.05);干预24、48、72 h后,与对照组相比,化疗组的细胞存活率显著降低(P<0.05、0.001);与化疗组相比,化疗+100 mg·L-1抑瘤汤组的细胞存活率显著降低(P<0.01、0.001),选取100 mg·L-1抑瘤汤干预48 h进行后续研究。与对照组相比,化疗组的细胞中NLRP3蛋白表达水平降低,但无统计学意义;与对照组及化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的细胞中NLRP3蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.001)。与对照组相比,化疗组和化疗+抑瘤汤组的NLRP3 mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P<0.05、0.001);与化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的NLRP3 mRNA和上清中蛋白水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,化疗组的Caspase-1、ASC、IL-1β的mRNA水平降低,但无统计学意义;化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1 β mRNA水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,化疗组和化疗+抑瘤汤组细胞上清中的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白水平显著降低(P<0.01、0.001);与化疗组相比,化疗+抑瘤汤组的Caspase-1、ASC、IL-1β蛋白进一步降低,其中Caspase-1、ASC差异显著(P<0.05、0.001)。结论 NLRP3炎症小体在卵巢癌中高表达,抑瘤汤可抑制卵巢癌细胞NLRP3炎症小体的表达。
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