敲低叉头盒蛋白M1抑制骨肉瘤细胞糖酵解

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rg595091068
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目的

观察叉头盒蛋白M1(FOXM1)对骨肉瘤细胞糖酵解水平的影响。

方法

FOXM1小干扰RNA(siRNA)慢病毒、对照siRNA慢病毒感染骨肉瘤细胞,记为FOXM1 siRNA和siRNA Control组,把未经慢病毒感染的细胞作为Control。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,试剂盒检测培养液上清中乳酸含量和细胞中三磷酸腺苷(ATP)含量,Western blot检测细胞中己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)蛋白水平。

结果

FOXM1 siRNA细胞中FOXM1 mRNA和蛋白水平均低于siRNA Control和Control组(FOXM1 mRNA:0.31±0.03比0.98±0.13比1.00±0.09;FOXM1蛋白:0.21±0.02比0.63±0.08比0.62±0.06,P<0.05)。与Control、siRNA Control组比较,FOXM1 siRNA细胞存活率降低[(64.17±3.25)%比(97.56±10.48)%比100.00%,P<0.05],细胞克隆形成率降低[(21.26±8.66)%比(49.89±7.36)比(45.16±9.23)%,P<0.05],上清中乳酸含量下降[(2.18±0.27) mmol/L比(4.62±0.68) mmol/L比(4.56±0.51) mmol/L,P<0.05],细胞中ATP含量也降低[(16.20±1.65) mmol/L比(33.58±4.15) mmol/L比(31.57±2.63) mmol/L,P<0.05],细胞中HK2、PKM2蛋白水平下降[HK2:0.20±0.02比0.38±0.05比0.35±0.03;PKM2:0.32±0.04比0.78±0.09比0.75±0.08,P<0.05]。

结论

敲低FOXM1能够降低骨肉瘤细胞增殖和克隆形成能力,降低骨肉瘤细胞糖酵解水平。

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