【摘 要】
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设计合成特异引物应用RT-PCR技术扩增堆型艾美耳球虫的3-1E基因。通过EcoRI和NotI双酶切，基因连接到表达载体PET28a上，转化入Escherichia coli BL21 （DE3）感受态细菌，挑取阳性菌落
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院,北京农业职业学院畜牧兽医系
【基金项目】
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国家自然基金资助项目（31072128）
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设计合成特异引物应用RT-PCR技术扩增堆型艾美耳球虫的3-1E基因。通过EcoRI和NotI双酶切，基因连接到表达载体PET28a上，转化入Escherichia coli BL21 （DE3）感受态细菌，挑取阳性菌落。经过双酶切和测序鉴定，证明含目的基因的表达载体PET28a构建成功。低温（16℃）诱导表达，经过SDS-PAGE和We-stren Bolt鉴定，表明此蛋白以可溶蛋白在细菌内表达。在诱导50h，IPTG浓度为0．4mmol／L时目的蛋白表达量最大。
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